冻存过的全血为什么不建议再拿来做elisa实验?
很多elisa实验新手客户都会咨询我司技术能否把全血提取出来放-70℃条件保存，等实验开展了(比如一个月左右的时间)再离心全血取血清或者血浆做elisa实验?这种做法我司技术都是持反对建议的。与此同时，也是明确要求我司销售人员在与客户售前沟通时建议老师全血样本提取好了应该及时离心出血清或者血浆。并要求-70℃条件下保存，如果一个月左右可以开展实验可以-20℃保存，期间不能反复冻融。至于冻存后的全血不可以再提取血清、血浆样本来做elisa的具体原因如下：
1.全血冻存后解冻，用常规离心方式提取血清仍然是可以的，不利的一点是，伴随冻融的过程，会出现比较严重的溶血事件。而后提取出来的血清能否做elisa，主要取决于溶血程度、你所要检测的目标蛋白的性质及你实验的目的。
2.溶血释放的胞内组分往往容易影响本底，甚至出现假阳性;而蛋白酶的释放可能导致目的蛋白的降解影响结果;目的蛋白的大小、稳定性、特异性(相对抗体而言)又影响其自身与酶标板的吸附、自身降解、自身与抗体的结合率等等。以上各种不确定性因素存在下，如果你只是对血清中某种血清蛋白做定性检测的话，做elisa应该问题不大;若是定量分析的话，从可靠性的角度上看，不建议该做法。
elisa试剂盒需求多少血样?
1.请问每孔需求多少ul血清，其他，比如说需求100ul血清，那么需求留取多少人抗凝血呢?一般常用的elisa试剂盒有96孔，根据试验需求做复孔，阴性、阳性对照组。复孔一般设3孔。
2.试验都是取5ml的抗凝血离心后取血清，能够得到许多血清。然后分装到ep管冻存，然后取一部分来做elisa试剂盒，其他的做其他试验用。
3.需求的样本量取决于你的检查项目,有些检查项目需求血清做1:100稀释,乃至是更高的稀释度,那么几微升血样就够了,有些项目只能做较低的稀释,乃至不稀释,这么的话每孔会需求100ul分配.
关于抗凝血和得到的联络,大致上份额是1毫升全血能够得到500ul血清或血浆.我血样是现已把细胞分离出来了的,现要提dna,试剂盒上说取0.3-0.5ml全血到1ml纯化树脂中,应取多少μl细胞?
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